[Страница 14/24] - Руководство: Разное LEICA HER2 FISH System

Инструкция для LEICA HER2 FISH System - 30 Test

(скачивание инструкции бесплатно)

Формат файла: PDF

Доступность: Бесплатно как и все руководства на сайте. Без регистрации и SMS.

Дополнительно: Чтение инструкции онлайн

Pу

сский

Стр. 14 из 24

Pу

сский

Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Инструкции по использованию TA9217 RU-CE-Rev_D 11/11/2013

могут быть изменения в методах фиксации и заливки тканей или собственные аномалии

в ткани (21). Избыточное или неполное контрокрашивание также может помешать

правильно интерпретировать результаты.
Неспецифическое окрашивание из-за несвязанного зонда имеет разрозненный, зернистый

вид и его можно наблюдать в ожидаемом месте гибридизации или на расстоянии от него.

Для интерпретации результатов окрашивания используйте неповрежденные клетки.

Омертвевшие или дегенерированные клетки могут окрашиваться неспецифично (22).

Неожиданное FISH-окрашивание и изменения в окрашивании могут быть результатом

изменений выраженности кодирующих генов или антигенов. Любое изменение ожидаемых

рисунков окрашивания следует интерпретировать в увязке со всеми остальными

диагностическими исследованиями. Интерпретация окрашивания должна дополняться

морфологическими исследованиями и использованием подходящего контрольного

материала, и должна оцениваться квалифицированным патологом в контексте истории

болезни пациента и других диагностических исследований.
Анализ (т.е. оценка адекватности средств контроля) и интерпретация любого

иммуногистохимического окрашивания или его отсутствия должны выполняться в

лаборатории, аккредитованной / лицензированной в установленном порядке, под

наблюдением имеющего соответствующую квалификацию и опыт патолога, отвечающего

за всю оценку анализа гибридизации

in situ

и его интерпретацию. Ложные положительные

результаты в FISH могут стать результатом перекрестной реактивности зонда по

отношению к другим последовательностям нуклеиновых кислот и/или неспецифического

связывания. Необходимо практиковать и документировать подходящие средства

контроля, а в исследованиях должны учитываться все сроки годности.
Технические и интерпретационные изменения можно также увидеть при использовании

FISH на материалах, извлеченных из колонии клеток (23).

B. Ограничения, относящиеся к продукту

Данный продукт не предназначен для использования ни в каком другом диагностическом

анализе на базе ДНК.
Не заменяйте реактивы Leica HER2 FISH System - 30 Test другими компонентами,

поставляемыми Leica Biosystems или другими изготовителями. В случае замены

валидация анализа отменяется. Пользователь обязан валидировать любое отклонение

от рекомендуемых процедур.
Рекомендуется использовать для анализа ткани, фиксируемые только в фиксажах на

основе формалина. Использование любых других типов фиксажа отменяет валидацию

анализа.
Секции ткани с толщиной среза, выходящей за пределы рекомендуемого диапазона, не

прошли валидацию. Использование ткани с недопустимой толщиной среза отменяет

валидацию анализа.

Клиническая конкордантность Leica HER2 FISH System - 30 Test к

Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit

В данном исследовании изучалась пригодность Leica HER2 FISH System - 30 Test к

использованию при определении лечения препаратом Herceptin (trastuzumab). Целью

исследования было изучить конкордантность между Leica HER2 FISH System - 30 Test и

диагностическим прибором Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit, считающимся

«золотым стандартом» для данного анализа. Испытание считалось успешным, если

нижняя граница 95%-го одностороннего доверительного интервала превышала 90%

между Leica HER2 FISH System - 30 Test и ручным Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA

Probe Kit, между положительным (усиление) и отрицательным (без усиления) случаями

у фиксированных формалином и пропитанных парафином (FFPE) тканей инвазивной

карциномы груди.
Исследование проводилось в трех лабораториях, с замаскированной оценкой клинических

образцов инвазивной карциномы груди. В каждую из лабораторий были предоставлены

архивированные фиксированные формалином и пропитанные парафином блоки

Оглавление инструкции

Страница 1 из 25
Pусский Leica HER2 FISH System - 30 Test Инструкции по использованию Для использования на системе Leica Biosystems BOND-MAX система и BOND-III системы. TA9217 представляет собой гибридизационный продукт для локальной флуоресценции, рассчитанный на окрашивание 30 исследований (30 предметных стекол,
Страница 2 из 25
Использование по назначению...............................................................................................................................................3 Для диагностики in
Страница 3 из 25
Pусский Использование по назначению Для диагностики in vitro Leica HER2 FISH System - 30 Test предназначен для определения усиления гена HER2/ neu через флуоресцентную гибридизацию in situ (FISH) в образцах ткани рака груди, фиксированных формалином и пропитанных парафином. Leica HER2 FISH System -
Страница 4 из 25
Leica HER2 FISH System - 30 Test содержит ДНК-зонд (меченый изотопом фрагмент ДНК) LSI HER2, непосредственно маркируемый флуоресцентный ДНК-зонд 226 Kb SpectrumOrange™, специфичный для местоположения гена HER2 (17q11.2-q12) и ДНК-зонд CEP17, непосредственно маркируемый флуоресцентный ДНК-зонд 5.4
Страница 5 из 25
Pусский Предоставляемые компоненты Перечисленных ниже материалов (Taблица 1) достаточно для окрашивания 30 исследований (30 предметных стекол, окрашенных с помощью LSI HER2/CEP17 Dual Probe). LSI HER2/CEP17 Probe Содержит готовый LSI HER2/CEP17 Dual Probe. 6,6 mL Содержит <60% (v/v) формамида. Post
Страница 6 из 25
Только для профессиональных пользователей. Один или несколько компонентов в продукте опасны и могут нанести вред неродившемуся ребенку. Как правило, лица моложе 18 лет не допускаются к работе с этим продуктом. Пользователи должны быть тщательно проинструктированы о порядке работы, опасных свойствах
Страница 7 из 25
Pусский C. Методология • Перед применением этой методологии пользователи должны быть должным образом обучены технологии автоматизированной флуоресцентной гибридизации in situ. • Каждая секция ткани, окрашенная с помощью LSI HER2/CEP17 Dual Probe, позволяет провести одинаковый клеточный анализ и
Страница 8 из 25
G. Хранение предметных стекол Храните окрашенные предметные стекла при –20 °C в темном месте. Разрешить слайды до комнатной температуры до просмотра после извлечения из –20 °C. Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Инструкции по использованию TA9217 RU-CE-Rev_D 11/11/2013 Стр. 8 из 24
Страница 9 из 25
Pусский Оценка и подсчет количества сигналов Для оценки качества сигналов и подсчет количества сигналов HER2 и CEP17 проделайте следующее: 1. Оценка качества предметных стекол Оцените качество предметных стекол по следующим критериям: 1. Оценка качества предметных стекол - Интенсивность сигнала
Страница 10 из 25
Для определения соотношения LSI HER2 и CEP17 используйте следующий метод: 1. Зафиксируйте и определите количество сигналов LSI HER2 и CEP17 в 20 ядрах (см. рис. 2 «Подсчет сигналов Leica HER2 FISH System - 30 Test» внизу). 2. Суммируйте все сигналы LSI HER2. Это будет сумма сигналов LSI HER2 для
Страница 11 из 25
Pусский Leica HER2 FISH System - 30 Test Руководство по интерпретации результатов Считайте как 2 оранжевых сигнала и 1 зеленый сигнал Не считайте. Ядра без сигналов или с сигналами только одного цвета не следует засчитывать. Засчитывайте только ядра с одним или более FISH-сигналами каждого цвета.
Страница 12 из 25
20 ядер, подсчет сигналов Ядро № HER2 Номер копии CEP17 Номер копии Ядро № 1 11 2 12 3 13 4 14 5 15 6 16 7 17 8 18 9 19 10 20 Всего 1-10 Всего 11-20 HER2 CEP17 HER2 Номер копии CEP17 Номер копии HER2:CEP17 коэффициент усиления Общий счет 1-20 В среднем на одну клетку Рисунок 2: Пример ведомости
Страница 13 из 25
Pусский Контроль качества Использование контрольных предметных стекол Рекомендуется включать по одному Leica HER2 FISH Control Slides в каждую исследуемую серию для контроля характеристик анализируемых образцов и оценки точности подсчета сигналов. Контрольные предметные стекла должны включаться в
Страница 14 из 25
Неспецифическое окрашивание из-за несвязанного зонда имеет разрозненный, зернистый вид и его можно наблюдать в ожидаемом месте гибридизации или на расстоянии от него. Для интерпретации результатов окрашивания используйте неповрежденные клетки. Омертвевшие или дегенерированные клетки могут
Страница 15 из 25
Pусский ткани инвазивной карциномы груди с известной выраженностью онкогенного белка HER2. Была выбрана и равномерно распределена в каждой лаборатории когорта из 300 образцов, из них 75 ранее охарактеризованных иммуногистохимических случаев на 0/1+, 150 ранее охарактеризованных
Страница 16 из 25
Данные были сгруппированы как отрицательные (<2.00) или положительные (≥2.00) для анализа 2x2. Наблюдаемая согласованность у 300 образцов между двумя исследованиями в анализе 2x2 показывает конкордантность 99,67% (299/300) с ДИ 95% из 98,16–99,99% для Leica BOND-III System. Процент положительного
Страница 17 из 25
Pусский Проверка точности – Leica BOND-MAX System A. Внутрисерийная проверка точности Внутрисерийная проверка точности была выполнена методом случайной выборки. Внутрисерийная точность Leica HER2 FISH System - 30 Test оценивалась в одной лаборатории на 540 ранее охарактеризованных образцах HER2 TMA
Страница 18 из 25
Проверка точности от партии к партии была выполнена методом случайной выборки. Точность от партии к партии определялась на трех партиях Leica HER2 FISH System - 30 Test, независимо изготовленных с применением зарекомендовавших себя технологий (GMP). Каждая партия испытывалась в одной лаборатории на
Страница 19 из 25
Pусский При исчислении предметных стекол, окрашенных при межлабораторной проверке точности, 511/513 оцененных случаев показали конкордантный результат с общей конкордантностью 99,61% с более низким 95% ДИ – 98,60%. K. Межнаблюдательная проверка точности Межнаблюдательная проверка точности была
Страница 20 из 25
Операции, выполненные за пределами рекомендуемых параметров надежности анализа, не прошли валидацию. Использование любых других параметров исследований может отменить валидацию анализа. Приведенный выше текст описывает протестированные условия и результаты этого исследования. Обратите внимание, что
Страница 21 из 25
Pусский Поиск и устранение неисправностей Проблема Отсутствует или очень слаб флуоресцентный сигнал / окрашивание Вероятная причина Неправильная фиксация или обработка исследуемого образца Должен использоваться фиксаж на основе формалина, а графики обработки должны быть пригодны для исследуемого
Страница 22 из 25
Неспецифический фоновый флуоресцентный сигнал / окрашивание Плохое сохранение морфологии ткани От предметных стекол пациента / контрольных предметных стекол отрывается ткань Вероятная причина Способ устранения Недостаточная послегибридизационная промывка Увеличьте время послегибридизационной
Страница 23 из 25
Pусский Справочный материал 1. Bargmann CI, Hung MC, Weinberg RA. The neu oncogene encodes an epidermal growth factor related protein. Nature 1986;319:226–30. 2. Lonardo F, Di Marco E, King CR, Pierce JH, Segatto O, Aaronson SA, et al. The normal erbB2 product is an atypical receptor-like tyrosine
Страница 24 из 25
Данный продукт содержит FISH-пробы PathVysion, предоставленные Abbott Molecular Inc. PathVysion, LSI и CEP являются торговыми марками Abbott Molecular Inc. Все права защищены. Используется по лицензии. Изменения и дополнения к предыдущему изданию Наименование продукции, информационного спонсора,
Страница 25 из 25

Инструкция для LEICA HER2 FISH System - 30 Test

Инструкции и руководства похожие на LEICA HER2 FISH System - 30 Test

Другие инструкции и руководства из категории Разное